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影响湖北ballbar球吧网电泳工艺的因素有哪些

发布日期:2021-09-09 作者: 点击:

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影响湖北ballbar球吧网电泳工艺的因素有哪些?阴级ballbar球吧网生产厂家从下面四个方面分析:

1.电渗

在电场中液体相对于固体固定相的相对运动称为电渗。在载体电泳中,影响ballbar球吧网电泳运动的一个重要因素是电渗作用。常见的情况是丙种球蛋白从原点向负极移动,这是电渗引起的反向移位现象。电渗的原因是载体通常含有可电离基团。例如,滤纸含有羟基且带负电。与滤纸接触的水溶液带正电荷,液体移动到负极。由于电渗常常与电泳同时存在,带电粒子的移动距离很小,电泳效果也受到影响。如果电泳方向与电渗方向相反,则实际电泳距离等于电泳距离和电渗距离。琼脂含有琼脂果胶,其中含有较多的硫酸盐。因此,在琼脂电泳中,电渗作用非常明显,许多球蛋白移向负极。当琼脂糖用作凝胶电泳时,电渗作用减弱。对于电渗引起的移动距离,可在支架中心放置中性有色染料或有色葡聚糖点,观察电渗的方向和距离。

2.电泳介质的PH值

对于蛋白质、氨基酸和其他两性电解质,pH值离等电点越远,粒子携带的电荷越多,游泳速度越快,反之亦然。因此,在分离混合物时,应选择能够扩大各种蛋白质电荷差的pH值,以促进各种蛋白质的有效分离。为了确保电泳过程中溶液的pH值恒定,必须使用缓冲溶液。

3.电场强度

电场强度是指每厘米的电位降(电位差或电位梯度)。湖北ballbar球吧网电场强度直接影响电泳速度。电场强度越高,带电粒子移动越快。根据实验需要,电泳可分为两种类型:一种是高压电泳,电压500~1000V或更高。由于电压高,电泳时间短(有些样品需要几分钟),适合于分离低分子化合物,如氨基酸和无机离子,包括分离部分聚焦电泳和分离序列电泳。由于高压和高热产生,必须安装冷却装置。否则,热会导致蛋白质和其他物质变性而无法分离。离子强度的增加和虹吸现象(电泳槽中的液体被吸到载体上)会影响物质的分离。另一种是大气压电泳,其产热量低。在10~25℃的室温下,蛋白质样品的分离不会受到破坏,无需冷却装置。一般来说,分离时间较长。

4.缓冲溶液的离子强度

溶液的离子强度是指溶液中每个离子的摩尔浓度与离子价平方的乘积的1/2。带电粒子的迁移率与离子强度的平方根成反比。在低离子强度时,迁移率较快,但离子强度过低,缓冲液的缓冲容量较小,很难保持恒定的pH值。在高离子强度时,迁移率较慢,但电泳带比低离子强度时薄且窄。通常,溶液的离子强度在0.02和0.2之间。


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